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    小鼠丙二醛( MDA)elisa試劑盒說明書

    發(fā)布時間: 2016/2/19  點擊次數(shù): 761次
    提 供 商: 研域(上海)化學(xué)試劑有限公司 資料大小:
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    標(biāo)本要求
    1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融
    2.不能檢測含NaN3的樣品,因 NaN3抑制辣根過氧化物酶的( HRP)活性。操作步驟
    1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。
    2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔。在酶標(biāo)包被板上標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)確加樣 50µl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液 40µl,
    然后再加待測樣品 10µl(樣品zui終稀釋度為 5倍)。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
    3.溫育:用封板膜封板后置 37℃溫育 3 0分鐘。
    4.配液:將 30倍濃縮洗滌液用蒸餾水 30倍稀釋后備用
    5.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置 30秒后棄去,如此重復(fù) 5次,拍干。
    6.加酶:每孔加入酶標(biāo)試劑 50µl,空白孔除外。
    7.溫育:操作同 3。
    8.洗滌:操作同 5。
    9.顯色:每孔先加入顯色劑 A50µl,再加入顯色劑 B50µl,輕輕震蕩混勻, 37℃避光顯色15分鐘.
    10.終止:每孔加終止液 50µl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn))。
    11.測定:以空白空調(diào)零, 450nm波長依序測量各孔的吸光度( OD值)。測定應(yīng)在加終止
     

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