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    兔P選擇素(Pselectin)分析試劑盒的發(fā)展趨勢(shì)

    發(fā)布時(shí)間: 2015/9/14  點(diǎn)擊次數(shù): 776次
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    兔P選擇素(Pselectin)分析試劑盒有著準(zhǔn)確性高、靈敏度高、特異性強(qiáng)的諸多優(yōu)點(diǎn),在實(shí)驗(yàn)室的應(yīng)用已經(jīng)相當(dāng)普及,絕大多數(shù)是用于檢測(cè)未知樣本中抗原的濃度。

    兔P選擇素(Pselectin)分析試劑盒自備材料:
    1.蒸餾水。
    2.加樣器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
    3.振蕩器及磁力攪拌器等。

    兔P選擇素(Pselectin)分析試劑盒安全性
    1、避免直接接觸終止液和底物A、B。一旦接觸到這些液體,請(qǐng)盡快用水沖洗。
    2、實(shí)驗(yàn)中不要吃喝、抽煙或使用化妝品。
    3、不要用嘴吸取試劑盒里的任何成份。

    兔P選擇素(Pselectin)分析試劑盒操作步驟
    1、使用前,將所有試劑充分混勻。不要使液體產(chǎn)生大量的泡沫,以免加樣時(shí)加入大量的氣泡,產(chǎn)生加樣上的誤差。
    2、根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù)。每個(gè)標(biāo)準(zhǔn)品和空白孔建議做復(fù)孔。每個(gè)樣品根據(jù)自己的數(shù)量來(lái)定,能使用復(fù)孔的盡量做復(fù)孔。
    3、加入稀釋好后的標(biāo)準(zhǔn)品50ul于反應(yīng)孔、加入待測(cè)樣品50ul于反應(yīng)孔內(nèi)。立即加入50ul的生物素標(biāo)記的抗體。蓋上膜板,輕輕振蕩混勻,37℃溫育1小時(shí)。
    4、甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
    5、每孔加入80ul的親和鏈酶素-HRP,輕輕振蕩混勻,37℃溫育30分鐘。
    6、甩去孔內(nèi)液體,每孔加滿(mǎn)洗滌液,振蕩30秒,甩去洗滌液,用吸水紙拍干。重復(fù)此操作3次。如果用洗板機(jī)洗滌,洗滌次數(shù)增加一次。
    7、每孔加入底物A、B各50ul,輕輕振蕩混勻,37℃溫育10分鐘。避免光照。
    8、取出酶標(biāo)板,迅速加入50ul終止液,加入終止液后應(yīng)立即測(cè)定結(jié)果。
    9、在450nm波長(zhǎng)處測(cè)定各孔的OD值。

    兔P選擇素(Pselectin)分析試劑盒樣品收集、處理及保存方法: 
    1、血清……操作過(guò)程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原
    和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血紅
    細(xì)胞迅速小心地分離。
    2、血漿……EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測(cè)。1000×g離心30分鐘去除顆粒。
    3、細(xì)胞上清液……1000×g離心10分鐘去除顆粒和聚合物。
    4、組織勻漿……將組織加入適量生理鹽水搗碎。1000×g離心10分鐘,取上清液。
    5、保存……如果樣品不立即使用,應(yīng)將其分成小部分-70℃保存,避免反復(fù)冷凍。盡可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量顆粒,檢測(cè)前先離心或過(guò)濾。不要在37℃或更高的溫度加熱解凍。應(yīng)在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。 

    兔P選擇素(Pselectin)分析試劑盒結(jié)果判斷與分析:
    1、儀器值:于波長(zhǎng)450nm的酶標(biāo)儀上讀取各孔的OD值
    2、以吸光度OD值為縱坐標(biāo)(Y),相應(yīng)的ATR-1標(biāo)準(zhǔn)品濃度為橫坐標(biāo)(X),做得相應(yīng)的曲線(xiàn),樣品的ATR-1含量可根據(jù)其OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)換算出相應(yīng)的濃度。
    3、檢測(cè)值范圍:0-40nmol/L
    4、敏感度:0.1 nmol/L

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