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    人脂蛋白(Lpa)定量檢測試劑盒 ELISA 試劑盒

    發(fā)布時間: 2015/2/9  點擊次數(shù): 748次
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    本試劑盒采用雙抗體一步夾心酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)。將標準品、待測樣本和酶標工作液加入到預(yù)先包被人脂蛋白(Lpa)抗體的透明酶標包被板中,溫育足夠時間后,洗滌除去未結(jié)合的成分。依次加入顯色劑A、B液,顯色劑(TMB)在辣根過氧化物酶(HRP)催化下轉(zhuǎn)化為藍色產(chǎn)物,在酸的作用下變成,顏色的深淺與樣品中人脂蛋白(Lpa)濃度呈正相關(guān),450nm波長下測定OD值,根據(jù)標準品和樣品的OD值,計算樣本中人脂蛋白(Lpa)含量。

    1、準備:從人脂蛋白(Lpa)定量檢測試劑盒 ELISA 試劑盒冰箱取出試劑盒,室溫復(fù)溫平衡30分鐘。

    2、配液:用蒸餾水將20倍濃縮洗滌液稀釋成原倍的洗滌液。

    3、加標準品和待測樣本:取足夠數(shù)量的酶標包被板,固定于框架上,分別設(shè)置標準品孔、待測樣本孔和空白對照孔,記錄各孔位置,在標準品孔中加入標準品50μL;待測樣本孔中先加入待測樣本10μL,再加樣本稀釋液40μL(即樣本稀釋5倍);每孔再加入酶標工作液100μL;空白對照孔不加。

    4、溫育:37℃水浴鍋或恒溫箱溫育60min。

    5、洗板:棄去液體,吸水紙上拍干,每孔加滿洗滌液,靜置1min,甩去洗滌液,吸水紙上拍干,如此重復(fù)洗板5次(也可用洗板機按說明書操作洗板)。

    6、顯色:每孔先加入顯色劑A 液50μL,再加入顯色劑B液 50μL,37℃避光顯色15min。

    7、終止:取出酶標板,每孔加終止液50μL,終止反應(yīng)(顏色由藍色立轉(zhuǎn))。

    8、測定:以空白孔調(diào)零,在終止后15分鐘內(nèi),用450nm波長測量各孔的吸光值(OD值)。

    9、計算:根據(jù)標準品的濃度及對應(yīng)的OD值,計算出標準曲線的直線回歸方程,再根據(jù)樣本的OD值,在回歸方程上計算出對應(yīng)的樣品濃度,也可以使用各種應(yīng)用軟件來計算。zui終濃度為實際測定濃度乘以稀釋倍數(shù)。

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